Susceptibility of different leukocyte cell types to Vaccinia virus infection

BACKGROUND: Vaccinia virus, the prototype member of the family Poxviridae, was used extensively in the past as the Smallpox vaccine, and is currently considered as a candidate vector for new recombinant vaccines. Vaccinia virus has a wide host range, and is known to infect cultures of a variety of cell lines of mammalian origin. However, little is known about the virus tropism in human leukocyte populations. We report here that various cell types within leukocyte populations have widely different susceptibility to infection with vaccinia virus. RESULTS: We have investigated the ability of vaccinia virus to infect human PBLs by using virus recombinants expressing green fluorescent protein (GFP), and monoclonal antibodies specific for PBL subpopulations. Flow cytometry allowed the identification of infected cells within the PBL mixture 1–5 hours after infection. Antibody labeling revealed that different cell populations had very different infection rates. Monocytes showed the highest percentage of infected cells, followed by B lymphocytes and NK cells. In contrast to those cell types, the rate of infection of T lymphocytes was low. Comparison of vaccinia virus strains WR and MVA showed that both strains infected efficiently the monocyte population, although producing different expression levels. Our results suggest that MVA was less efficient than WR in infecting NK cells and B lymphocytes. Overall, both WR and MVA consistently showed a strong preference for the infection of non-T cells. CONCLUSIONS: When infecting fresh human PBL preparations, vaccinia virus showed a strong bias towards the infection of monocytes, followed by B lymphocytes and NK cells. In contrast, very poor infection of T lymphocytes was detected. These finding may have important implications both in our understanding of poxvirus pathogenesis and in the development of improved smallpox vaccines

Inherited Retinal Dystrophies: Role of Oxidative Stress and Inflammation in Their Physiopathology and Therapeutic Implications

Inherited retinal dystrophies (IRDs) are a large group of genetically and clinically heterogeneous diseases characterized by the progressive degeneration of the retina, ultimately leading to loss of visual function. Oxidative stress and inflammation play fundamental roles in the physiopathology of these diseases. Photoreceptor cell death induces an inflammatory state in the retina. The activation of several molecular pathways triggers different cellular responses to injury, including the activation of microglia to eliminate debris and recruit inflammatory cells from circulation. Therapeutical options for IRDs are currently limited, although a small number of patients have been successfully treated by gene therapy. Many other therapeutic strategies are being pursued to mitigate the deleterious effects of IRDs associated with oxidative metabolism and/or inflammation, including inhibiting reactive oxygen species’ accumulation and inflammatory responses, and blocking autophagy. Several compounds are being tested in clinical trials, generating great expectations for their implementation. The present review discusses the main death mechanisms that occur in IRDs and the latest therapies that are under investigation.This research was funded by DGA group B08_17R: Investigación en Retina y Sistema Visual and Fondo Europeo de Desarrollo Regional (FEDER) funds: “Una manera de hacer Europa”, Ministerio de Ciencia e Innovación (FEDER-PID 2019-106230RB-I00), Instituto de Salud Carlos III (PI20/00740-FEDER, RETICS-FEDER RD16/0008/0016), Generalitat Valenciana-FEDER (IDIFEDER/2017/064, PROMETEO/2021/024), Ministerio de Universidades (FPU16/04114), Es Retina Asturias (2019/00286/001). The APC was funded by DGA group B08_17R: Investigación en Retina y Sistema Visual (FEDER)

Cellular and molecular alterations in neurons and glial cells in inherited retinal degeneration

Multiple gene mutations have been associated with inherited retinal dystrophies (IRDs). Despite the spectrum of phenotypes caused by the distinct mutations, IRDs display common physiopathology features. Cell death is accompanied by inflammation and oxidative stress. The vertebrate retina has several attributes that make this tissue vulnerable to oxidative and nitrosative imbalance. The high energy demands and active metabolism in retinal cells, as well as their continuous exposure to high oxygen levels and light-induced stress, reveal the importance of tightly regulated homeostatic processes to maintain retinal function, which are compromised in pathological conditions. In addition, the subsequent microglial activation and gliosis, which triggers the secretion of pro-inflammatory cytokines, chemokines, trophic factors, and other molecules, further worsen the degenerative process. As the disease evolves, retinal cells change their morphology and function. In disease stages where photoreceptors are lost, the remaining neurons of the retina to preserve their function seek out for new synaptic partners, which leads to a cascade of morphological alterations in retinal cells that results in a complete remodeling of the tissue. In this review, we describe important molecular and morphological changes in retinal cells that occur in response to oxidative stress and the inflammatory processes underlying IRDs.This research was funded by the DGA group B08_17R: Investigación en Retina y Sistema Visual and Fondo Europeo de Desarrollo Regional (FEDER) funds: “Una manera de hacer Europa”, Ministerio de Ciencia e Innovación (FEDER-PID 2019-106230RB-I00), Instituto de Salud Carlos III (PI20/00740-FEDER, RETICS-FEDER RD16/0008/0016), Generalitat Valenciana-FEDER (IDIFEDER/2017/064, PROMETEO/2021/024), Ministerio de Universidades (FPU16/04114), Es Retina Asturias (2019/00286/001). The APC was funded by the DGA group B08_17R: Investigación en Retina y Sistema Visual (FEDER)

Estudio de las interacciones de FurA y otros reguladores transcripcionales implicados en el metabolismo del hierro y del nitrógeno

Las proteínas Fur (ferric uptake regulator) son una superfamilia de reguladores de la transcripción presentes en la mayoría de los organismos procariotas. Tienen un papel clave en la regulación del metabolismo del hierro y en otros procesos celulares clave, como la defensa frente al estrés oxidativo, la regulación del metabolismo del nitrógeno, la diferenciación de heterocistos en cianobacterias o la virulencia en los patógenos. Se han abordado dos objetivos principales referidos a las proteínas Fur. Por un lado se han estudiado las interacciones entre las proteínas de la familia Fur presentes en Anabaena sp. PCC 7120: FurA, FurB y FurC in vivo. Los resultados obtenidos indican que las proteínas FurA, FurC y en menor medida, FurB, forman homodímeros, y que es muy posible que las tres proteínas interaccionen entre sí. Por otro lado se ha purificado la proteína Fur de Erwinia amylovora y se ha realizado una caracterización parcial. E. amylovora es la bacteria que causa el fuego bacteriano, una enfermedad de las plantas muy extendida y que ha causado graves problemas fitosanitarios y económicos. La captación de hierro en el hospedador es uno de los principales mecanismos de patogenicidad de esta enfermedad por lo que el estudio de Fur permitirá conocer mejor el mecanismo de infección de E. amylovora y aplicar posibles soluciones para remediar el fuego bacteriano. Se ha purificado Fur de E. amylovora por columna de afinidad a Cu2+, se ha hecho un estudio de oligomerización y se ha detectado zinc estructural en su forma reducida

Ensayo de evaluación a distancia frente a evaluación presencial

El sistema de evaluación debe valorar las competencias adquiridas por el estudiante según los conocimientos, habilidades y aptitudes que ha desarrollado a lo largo del proceso de enseñanza-aprendizaje. Este proceso debe ser válido, además de confiable y práctico. Es necesario estudiar los diversos métodos de evaluación disponibles y su idoneidad para las distintas actividades de los grados. El hecho de disponer de herramientas que permiten realizar una evaluación a distancia nos hizo plantearnos la idoneidad de este sistema. Así pues, con el objeto de evaluar la fiabilidad de la evaluación a distancia, se realizó una experiencia en la que se compararon las calificaciones obtenidas en actividades prácticas y seminarios, empleando ambas modalidades de evaluación: presencial y a distancia, mediante las herramientas del campus virtual. Como pudimos comprobar, no hubo diferencias significativas según la modalidad de evaluación, por lo que, con los datos de los que disponemos, podemos aceptar ambos sistemas como igualmente efectivos. Estudiamos también el efecto de la realización de una prueba previa de autoevaluación. En este caso sí encontramos como consecuencia un ligero incremento en la nota, por lo que recomendamos esta actividad para la mejora del rendimiento académico

Material docente electrónico como complemento a los recursos del aula

En el escenario actual, la disponibilidad de nuevas herramientas multimedia favorece la generación de materiales docentes con características diferenciales respecto a los tradicionalmente dispuestos. Las nuevas tecnologías y las redes sociales permiten la difusión de los contenidos, siendo mayor la aceptación por parte del alumnado cuanto más atractiva sea su presentación. Este fenómeno, bien diseñado y planteado puede resultar una herramienta útil como recurso de enseñanza-aprendizaje. El diseño de material docente que utilice estos recursos multimedia puede suponer, si se utiliza bien, un aliciente añadido para el alumno, de forma que, además de fomentar su interés por la materia, se puede potenciar su aprendizaje. En este contexto resulta de especial interés el diseño de herramientas a utilizar como material en formato de audio, vídeo u otros recursos electrónicos que estimulen el trabajo autónomo del estudiante. Pese a la buena planificación y diseño, la disponibilidad y/o elaboración de material docente de buena calidad, especialmente en el mundo audiovisual e interactivo en el que nos encontramos, supone una barrera a solventar

Integración del inglés en materias de Anatomía

En el curso 2012-13 iniciamos un proyecto de trabajo en red para favorecer la integración del inglés en 5 materias de Ciencias de la Salud. Dado que el aprendizaje de esta segunda lengua es una competencia básica transversal e instrumental en los Grados de la Universidad de Alicante, en el presente estudio pretendemos valorar el nivel de adquisición simultánea en lengua inglesa y española de nuevos términos anatómicos, así como el nivel de conocimientos genéricos de comprensión lectora y escritora del inglés. Para ello, al principio y final del primer semestre del curso 2013-14, se realizaron encuestas con preguntas de respuesta múltiple en las asignaturas de Anatomía impartidas en los primeros cursos de 4 Grados: Enfermería, Nutrición Humana y Dietética, Óptica y Optometría y Ciencias de la Actividad Física y del Deporte. Observamos una cierta mejora en la adquisición de términos anatómicos en inglés según el sistema de aprendizaje integrado de contenidos en lengua extranjera (AICLE). Sin embargo, los conceptos genéricos de la lengua inglesa permanecen constantes o incluso se algo disminuidos. Concluimos que en un entorno AICLE, con materiales curriculares bilingües, se obtienen buenos resultados de aprendizaje en las materias de Anatomía integradas con el inglés

Rendimiento académico del ABP en Anatomía

Desde que en la Universidad de Alicante se implantaron los nuevos planes de estudios EEES en el curso 2010-11, hasta la actualidad, se ha estado aplicando la metodología docente colaborativa de aprendizaje basado en problemas (ABP) en asignaturas del área de Anatomía Humana y Embriología impartidas en los primeros cursos de las titulaciones de Grado en “Enfermería”, “Nutrición Humana y Dietética”, “Óptica y Optometría” y “Ciencias de la Actividad Física y del Deporte”. El objetivo de este estudio es comparar los resultados de aprendizaje a través del rendimiento académico obtenido en la evaluación continua según diferentes metodologías docentes. En general, las calificaciones obtenidas en la evaluación de la exposición oral en grupo del trabajo ABP fueron mucho mejores en todas las asignaturas a lo largo de los últimos 5 años. Los resultados de las pruebas objetivas de respuesta múltiple usadas para evaluar los logros de aprendizaje mediante el uso de clases magistrales de teoría y prácticas de laboratorio fueron algo inferiores. Se plantea la posibilidad de incrementar el número de actividades de ABP y asignar un mayor peso en la ponderación de los criterios de evaluación de la asignatura

New Nrf2-Inducer Compound ITH12674 Slows the Progression of Retinitis Pigmentosa in the Mouse Model rd10

Background/Aims: It is well established that oxidative stress and inflammation are common pathogenic features of retinal degenerative diseases. ITH12674 is a novel compound that induces the transcription factor Nrf2; in so doing, the molecule exhibits anti-inflammatory, and antioxidant properties, and affords neuroprotection in rat cortical neurons subjected to oxidative stress. We here tested the hypothesis that ITH12674 could slow the retinal degeneration that causes blindness in rd10 mice, a model of retinitis pigmentosa. Methods: Animals were intraperitoneally treated with 1 or 10 mg/Kg ITH12674 or placebo from P16 to P30. At P30, retinal functionality and visual acuity were analyzed by electroretinography and optomotor test. By immunohistochemistry we quantified the photoreceptor rows and analyzed their morphology and connectivity. Oxidative stress and inflammatory state was studied by Western blot, and microglia reactivity was monitored by flow cytometry. The blood−brain barrier permeation of ITH12674 was evaluated using a PAMPA-BBB assay. Results: In rd10 mice treated with 10 mg/Kg of the compound, the following changes were observed (with respect to placebo): (i) a decrease of vision loss with higher scotopic a- and b-waves; (ii) increased visual acuity; (iii) preservation of cone photoreceptors morphology, as well as their synaptic connectivity; (iv) reduced expression of TNF-α and NF-κB; (v) increased expression of p38 MAPK and Atg12-Atg5 complex; and (vi) decreased CD11c, MHC class II and CD169 positive cell populations. Conclusion: These data support the view that a Nrf2 inducer compound may arise as a new therapeutic strategy to combat retinal neurodegeneration. At present, we are chemically optimising compound ITH12674 with the focus on improving its neuroprotective potential in retinal neurodegenerative diseases.This work was supported by grants from Bayer (Grats4Targets), from the Spanish Ministry of Economy and Competitiveness (MINECO-FEDER BFU2015-67139-R), Spanish Ministry of Education (FPU14/03166, FPU13/03737 and FPU16/04114), Instituto de Salud Carlos III co-financed by the European Regional Development’s funds (FEDER) (RETICS-FEDER RD16/0008/0016, Programa Miguel Servet II (CP16/00014) and research project (grant PI17/01700)), Asociación Retina Asturias, Fundación La Caixa, CaixaImpulse program (grant CI17-00048), Comunidad Autónoma de Madrid (grant B2017/BMD-3827), Generalitat Valenciana (PROMETEO/2016/158 and ACIF/2016/055) Generalitat Valenciana-FEDER IDIFEDER/2017/064

¿Se aprende inglés a la vez que anatomía?

Continuando un proyecto previo, se pretende favorecer la integración del inglés en materias de Ciencias de la Salud impartidas en los Grados de Enfermería, Nutrición Humana y Dietética, Óptica y Optometría y Ciencias de la Actividad Física y del Deporte de la Universidad de Alicante. En el curso 2013-14 se obtienen y analizan los resultados de las encuestas sobre el progreso del aprendizaje y competencias en inglés según el sistema de aprendizaje integrado de contenidos en lengua extranjera (AICLE). Mediante una encuesta de preguntas de respuesta múltiple se valoran las competencias lectoras y escritoras en inglés genérico y específico para contenidos de Anatomía impartidos en cada una de las asignaturas. Con una pregunta de valoración subjetiva se obtiene una aproximación del nivel de conocimientos de inglés que cada alumno considera poseer. Estas encuestas se respondieron al principio y final del primer cuatrimestre. En general, se aprecia una cierta mejora en los aprendizajes de términos anatómicos en inglés, mientras que los relativos a conceptos genéricos de la lengua inglesa permanecen constantes o incluso ligeramente mermados. Se concluye que en un entorno AICLE, con materiales curriculares bilingües, se obtienen buenos resultados de aprendizaje propios de cada materia integrada con el inglés